Victor John Mature lahir di Louisville, Kentucky, dari pasangan Clara P. (Ackley) dan Marcellus George Mature, seorang tukang potong dan pengasah pisau. Ayahnya berdarah Italia, lahir di Pinzolo, Trentino, dengan nama asli Marcello Gelindo Maturi. Ibunya keturunan Swiss-German dan Jerman. Saat remaja, ia bekerja sebagai salesman perlengkapan daging bersama ayahnya.

Berkeinginan menjadi aktor, Victor belajar di Pasadena Playhouse, California. Ia pernah audition untuk peran dalam Gone with the Wind (1939), namun peran utama akhirnya dimainkan George Reeves. Setelah beberapa film awal yang mendapatkan pengakuan, ia bertugas di Coast Guard saat Perang Dunia II.

Setelah perang, ia menjadi salah satu aktor paling sibuk dan populer di Hollywood, walaupun penghargaan kritis jarang diberikan kepadanya. Karya-karyanya yang terkenal meliputi My Darling Clementine dan Kiss of Death, yang dianggap sebagai karya terbaiknya. Ia mulai berperan dalam film-film eksotis seperti Samson and Delilah dan The Egyptian.

Victor bukan aktor yang energik atau berorientasi tinggi secara artistik, namun tetap menjadi pilar Hollywood, tampil di film-film besar seperti The Robe. Minatnya lebih ke golf, sehingga penampilannya berkurang di tahun 1960-an. Ia melakukan comeback kecil lewat film komedi Neil Simon, Caccia alla volpe, tahun 1966. Setelah itu, ia fokus pada golf dan akhirnya pensiun. Ia sempat muncul sebagai cameo di TV dan di remake Samson and Delilah tahun 1984, lalu memutuskan pensiun total. Rumor tentang comeback selalu muncul, namun tidak pernah terealisasi. Victor Mature meninggal karena kanker di Rancho Santa Fe, California, tahun 1999.