Deborah Ann Woll lahir pada tahun 1985 di Brooklyn, New York, dari keturunan Irlandia dan Jerman. Ia mulai belajar akting, piano, dan tarian sejak muda. Setelah menempuh pendidikan di Packer Collegiate Institute, ia menyelesaikan program BFA di USC School of Theatre, University of Southern California.

Deborah memulai karier syuting televisi dan mendapatkan pengakuan besar melalui perannya sebagai Jessica Hamby dalam drama vampir HBO, True Blood (2008). Sejak itu, ia membintangi film seperti Mother's Day (2010), Seven Days in Utopia (2011), dan Ruby Sparks (2012). Ia juga aktif mendukung isu kesehatan dan membantu advokasi penderita penyakit langka.

Pasangannya, Edward E.J. Scott, adalah komedian yang keluarga terkena choroideremia, penyakit yang menyebabkan kebutaan progresif. Deborah menggunakan ketenaran dan pengaruhnya untuk mendukung perjuangan mereka dan komunitas yang terkena dampak.

Pengalaman pribadi dan keberanian pacarnya dalam menghadapi disabilitas menginspirasi Deborah dalam berjuang melawan penyakit Celiac, gangguan yang membuat tubuhnya tidak toleran terhadap gluten. Ia dikenal tidak hanya sebagai artis tapi juga sebagai aktivis yang peduli terhadap isu kesehatan.